Anxiolytic-like activity of Aloysia virgatavar. platyphylla leaves extract in mice / Actividad ansiolítica del extracto de hojas de Aloysia virgatavar. platyphylla en ratones

Background: Medicinal plants are part of traditional medicine and should be considered a therapeutic alternative for mental diseases. Several plants belonging to the Verbenaceae family have proved useful in treating general anxiety disorders, the most prevalent psychiatric disorders. Objective: This research aimed to verify the extract's safety, the effect on general behavior, and the effect on sleeping time, as well as to evaluate the anxiolytic-like effect of the methanol extract of Aloysia virgata var. platyphylla (Avp), in mice. Methodology: The toxicity test was done according to the OECD guide (mice groups n=5), and general behavior was observed during the assay. Sleeping time was assessed using the pentobarbital-induced hypnosis method (n=8). Male Swiss albino mice (n=6) were treated with 50 to 400 mg/kg of Avp extract and diazepam as a control. The anxiolytic-like effect was tested through the hole board and elevated plus-maze test. Results: The Avp extract has no side effects in tested doses, and no central nervous system depressant activity was noted. A. virgatavar. platyphyllaincreased exploration (number and time) in the hole board. In the elevated plus-maze, increased number and time into open arms were evidenced compared to the control group. Conclusion: With all these results, we concluded that the Avp extract is safe and has a potential anxiolytic-like activity in the animal model used

Antecedentes: Las plantas medicinales forman parte de la medicina tradicional y deben ser consideradas una alternativa terapéutica para las enfermedades mentales. Varias plantas pertenecientes a la familia Verbenaceae han demostrado su utilidad en el tratamiento de los trastornos de ansiedad, uno de los trastornos psiquiátricos más prevalentes. Objetivo: Esta investigación tuvo como objetivo verificar la seguridad del extracto, el efecto sobre el comportamiento general y el efecto sobre el tiempo de sueño, así como evaluar el efecto tipo ansiolítico del extracto metanólico de Aloysia virgata var. platyphylla(Avp), en ratones. Metodología: La prueba de toxicidad se realizó de acuerdo con la guía de la OCDE (grupos de ratones n=5), y se observó el comportamiento general durante el ensayo. El tiempo de sueño se evaluó mediante el método de hipnosis inducida por pentobarbital (n=8). Se trataron ratones albinos suizos macho (n=6) con 50 a 400 mg/kg de extracto de Avp y diazepam como control. El efecto ansiolítico se probó a través de la placa perforada y prueba del laberinto en cruz elevado. Resultados: El extracto de Avp no tiene efectos secundarios en las dosis probadas y no se observó actividad depresora del sistema nervioso central. A. virgata var. platyphylla aumentó la exploración (número y tiempo) en el tablero de agujeros. En el laberinto en cruz elevado, se evidenció un mayor número y tiempo en los brazos abiertos en comparación con el grupo de control. Conclusión: Con todos estos resultados, concluimos que el extracto de Avp es seguro y tiene una potencial actividad ansiolítica en el modelo animal utilizado

Efecto del extracto hidroalcohólico de la planta Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) sobre la esteatosis inducida in vitro en hepatocitos humanos / Effect of the hydroalcoholic extract of the plant Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) on in vitro-induced steatosis in human hepatocytes

INTRODUCCIÓN: La enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA) es la forma más común de enfermedad hepática. A nivel celular se caracteriza por la acumulación de triglicéridos (TG) en forma de gotas lipídicas (GL) dando lugar a esteatosis e inflamación. Entre los factores relevantes para la síntesis de TG se encuentran las enzimas DGAT1/2 que catalizan la etapa final de la síntesis de TG, y la proteína FABP4 que transporta lípidos intracelulares y se expresa en modelos de enfermedad hepática dependiente de obesidad. Por otra parte, TNF-α es una reconocida citoquina involucrada en el proceso inflamatorio en la EHGNA. La medicina popular del norte de Chile ha utilizado la planta Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) para el tratamiento de algunas enfermedades inflamatorias. OBJETIVO: Evaluar el efecto de un extracto hidroalcóholico de lampaya (EHL) sobre la esteatosis y expresión de marcadores de inflamación en hepatocitos tratados con ácidos grasos. Diseño experimental: Estudio in vitro en cultivos de la línea celular humana HepG2 tratadas con ácido oleico (AO) y ácido palmítico (AP). MÉTODOS: Se incubó hepatocitos HepG2 con AO/AP por 24 horas en presencia o no de EHL. Se evaluó la presencia de GL y el contenido de TG intracelulares por Oil Red O y Nile Red, respectivamente. La expresión de DGAT1/2, FABP4 y TNF-α fue evaluada por qPCR. RESULTADOS: Los hepatocitos tratados con AO/AP mostraron un aumento en las GL y TG, así como una mayor expresión de DGAT2 en comparación al control. El cotratamiento con EHL revirtió los efectos inducidos por AO/AP. CONCLUSIONES: EHL revierte el incremento en las GL, TG y en la expresión de DGAT2 inducido por AO/AP en células HepG2. Estos hallazgos sugieren un efecto hepatoprotector de la Lampaya contra la esteatosis, y apoyarían su uso complementario en el tratamiento de patologías con componente inflamatorio como la EHGNA.

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is the most common liver disease. At the cellular level, it is characterized by the accumulation of triglycerides (TG) in the form of lipid droplets (LD), which leads to steatosis and inflammation. Among relevant factors for TG synthesis are the enzymes DGAT1/2 catalyzing the final stage of TG synthesis, and the protein FABP4 which transports intracellular lipids and is expressed in cell models of obesity-dependent liver disease. Additionally, TNF-α is a cytokine involved in the inflammatory process associated to NAFDL. Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) is a plant used in folk medicine in northern Chile to treat some inflammatory diseases. OBJECTIVE: To evaluate the effect of the hydroalcoholic extract of lampaya (HEL) on steatosis and the expression of inflammatory markers in hepatocytes treated with fatty acids. Study design: In vitro study in cultures of the human HepG2 cell line treated with oleic acid (OA) and palmitic acid (PA). METHODS: HepG2 hepatocytes were incubated with OA/PA for 24 hours in the presence and absence of HEL. The formation of LD and the accumulation of intracellular TG were assessed by Oil Red O and Nile Red, respectively. The expression of DGAT1/2, FABP4 and TNF-α was assessed by qPCR. RESULTS: The treatment with OA/PA increased the levels of LD and TG as well as the expression of DGAT2 in HepG2 hepatocytes compared to control cells. HEL cotreatment counteracted OA/PA-induced effects. CONCLUSIONS: HEL prevents the increase in LD and TG levels and DGAT2 expression induced by OA/PA in HepG2 cells. These findings suggest that lampaya may have a protective effect against hepatic steatosis, which would support its complementary use in the treatment of pathologies associated with inflammation, such as NAFLD.

Effect of meteorological elements on the content and composition of Aloysia triphylla (L´Hérit) Britton essential oil / Efecto de los elementos meteorológicos sobre el contenido y la composición del aceite esencial de Aloysia triphylla (L´Hérit) Britton

The concentration and composition of an essential oil can vary according to environmental variations and seasonal periods. The objective of this study was to correlate meteorological elements with the content and concentration of components of Aloysia triphylla essential oil, for the four seasons of the year. The experiment was conducted in a plastic greenhouse of the UFSM, Frederico Westphalen campus ­ RS, Brazil, in a complete randomized blocks design during the four seasons, with three repetitions. The meteorological data were collected with the aid of a compact meteorological station, in order to characterize the environment in which the species was conducted. The evaluations were carried out at the middle date of each season. It was observed a correlation between the meteorological variables with the essential oil production and its components. According to the analysis, there influence of the temperature on the essential oil contents, considering that the maximum temperature shows a direct positive influence on the concentration of limonene and negative for spathulenol.

El contenido y la composición de un aceite esencial pueden variar según las variaciones ambientales y los períodos estacionales. El objetivo de este estudio fue correlacionar los elementos meteorológicos con el contenido y la concentración de los componentes del aceite esencial de Aloysia triphylla, para las cuatro estaciones del año. El experimento se realizó en un invernadero de plástico de la UFSM, campus de Frederico Westphalen - RS, Brasil, en un diseño completo de bloques al azar durante las cuatro estaciones, con tres repeticiones. Los datos meteorológicos se recopilaron con la ayuda de una estación meteorológica compacta, para caracterizar el entorno en el que se realizó la especie. Las evaluaciones se llevaron a cabo en la fecha media de cada temporada. Se observó una correlación entre las variables meteorológicas con la producción de aceites esenciales y sus componentes. De acuerdo con el análisis, existe una influencia de la temperatura en los contenidos de aceites esenciales, considerando que la temperatura máxima muestra una influencia positiva directa sobre la concentración de limoneno y negativa para el espatulenol.

Essential oil composition in natural population of Lippia origanoides (Verbenaceae) during dry and rainy seasons / Composición de los aceites esenciales en poblaciones naturales de Lippia origanoides (Verbenaceae) durante las estaciones seca y lluviosa

Abstract Lippia origanoides Kunth. is a medicinal shrub native to some countries in South America, Central America and the Caribbean. This study aims to investigate the chemical composition of the essential oil and the genetic diversity of a natural population of Lippia origanoides in two seasons. Leaf samples were collected from 30 individuals in the dry and rainy seasons. The essential oil was extracted into a Clevenger apparatus and analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The relative quantification of thymol and carvacrol was performed by gas chromatography coupled to a flame ionization detector (GC-FID). Multivariate analysis was used to evaluate the genetic divergence between plants. Carvacrol was the major compound found in most plants for both seasons. In the rainy season, plant 15 presented thymol as the major compound, and plants 16, 27, 28 and 29 presented camphor as the major compound. In the dry season, thymol remained the main compound of plant 15 and camphor remained the main compound of plants 16, 28 and 29; however, plant 27 presented carvacrol as the main compound in this season. After carvacrol, the compounds with the highest content were γ-terpinene, p-cymene and methyl-ether-thymol. Of the 30 plants studied, only five differed in their chemical composition, showing some degree of stability in relation to the dry and rainy seasons. There was no variation in the main compounds between the two seasons, but there was chemical diversity among the main compounds. Tocher grouping revealed five distinct groups, with group 1 including most of the plants in both dry and rainy seasons, indicating that the time of year evaluated did not significantly interfere with the essential oil composition of most plants.(AU)

Resumen Lippia origanoides Kunth. es un arbusto medicinal nativo de algunos países de Centro y Sur América y el Caribe. El objetivo de este estudio fue investigar la composición química de los aceites esenciales y la diversidad genética de una población natural de L. origanoides en dos estaciones. El aceite esencial se extrajo en un equipo de Clevenger y se analizó por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas (CG-EM). La cuantificación relativa de timol y carvacrol se realizó por cromatografía de gases acoplado a un detector de ionización de llamas (CG-DIL). Se utilizó un análisis multivariado para evaluar la divergencia genética entre plantas. El carvacrol fue el compuesto principal encontrado en la mayoría de las plantas para ambas estaciones. En la estación lluviosa, la planta 15 presentó timol como el compuesto principal y las plantas 16, 27, 28 y 29 presentaron alcanfor como el compuesto principal. En la estación seca, el timol se mantuvo como el principal compuesto en la planta 15, de igual manera el alcanfor se mantuvo como el principal en las plantas 16, 28 y 29. Sin embargo, la planta 27 presentó carvacrol como el principal compuesto en esta estación. Después del carvacrol, los compuestos con el mayor contenido fueron γ-terpineno, p-cimeno and metil-eter-timol. De las 30 plantas estudiadas, solo cinco difirieron en su composición química, mostrando algún grado de estabilidad en relación a la estación seca y lluviosa. No hubo variación en los compuestos principales entre las dos estaciones, pero hubo diversidad química entre los compuestos principales. El agrupamiento de Tocher mostró cinco grupos distintos, con el grupo 1 incluyendo la mayoría de las plantas en ambas estaciones, lo cual indica que el periodo del año evaluado no interfiere significativamente con la composición de aceites esenciales en la mayoría de plantas.(AU)

Anesthesia of Epinephelus marginatus with essential oil of Aloysia polystachya: an approach on blood parameters

ABSTRACT This study investigated the anesthetic potential of the essential oil (EO) of Aloysia polystachya in juveniles of dusky grouper (Epinephelus marginatus). Fish were exposed to different concentrations of EO of A. polystachya to evaluate time of induction and recovery from anesthesia. In the second experiment, fish were divided into four groups: control, ethanol and 50 or 300 µL L−1 EO of A. polystachya, and each group was submitted to induction for 3.5 min and recovery for 5 or 10 min. The blood gases and glucose levels showed alterations as a function of the recovery times, but Na+ and K+ levels did not show any alteration. In conclusion, the EO from leaves of A. polystachya is an effective anesthetic for dusky grouper, because anesthesia was reached within the recommended time at EO concentrations of 300 and 400 µL L−1. However, most evaluated blood parameters showed compensatory responses due to EO exposure.

Antibacterial activity of essential oils of aloysia polystachya and lippia turbinata (Verbenaceae) / Actividad antibacteriana de los aceites esenciales de aloysia polystachya y lippia turbinata (Verbenaceae)

Aloysia polystachya and Lippia turbinata are medicinal and aromatic plants. Nevertheless, there are few reports in literature concerning the biological properties of species that grow in northeastern Argentina. The antibacterial activity and the chemical composition of both essential oils were evaluated in this work. The extraction was performed by steam distillation and their volatile compounds were determined by gas chromatography/mass spectrometry. The antibacterial activity was evaluated by disc diffusion and broth microdilution assay. The main compounds were carvone (78.9 percent) and limonene (14.2 percent) in A. polystachya and carvone (80.77 percent), limonene (8.73 percent), beta- caryophyllene (2.13 percent) and 1,8-cineole (1.70 percent) in L. turbinata. Both essential oils were bactericide against Escherichia coli ATCC 35218 and clinical isolates of Enterobacter cloacae and Klebsiella pneumoniae. Essential oil of A. polystachya was also bactericide against Staphylococcus aureus ATCC 29212, S. aureus ATCC 25923 and clinical strain of S. aureus methicillin susceptible.

Aloysia polystachya y Lippia turbinata son plantas medicinales y aromáticas. Hay pocos informes en la literatura sobre las propiedades biológicas de especies que crecen en el nordeste de Argentina. La actividad antibacteriana y la composición química de ambas especies se evaluaron en este trabajo. La extracción se realizó por destilación con vapor y sus compuestos se determinaron por cromatografía gaseosa/espectrometría de masa. La actividad antibacteriana fue evaluada por difusión en discos y microdilución en caldo. Los principales compuestos fueron carvona (78.9 por ciento) y limoneno (14.2 por ciento) en A. polystachya y carvona (80.77 por ciento), limoneno (8.73 por ciento), beta-cariofileno (2.13 por ciento) y 1,8-cineol (1.70 por ciento) en L. turbinata. Ambos aceites esenciales fueron activos contra Escherichia coli ATCC 35218 y aislamientos clínicos de Enterobacter cloacae y Klebsiella pneumoniae. El aceite esencial de A. polystachya fue bactericida contra Staphylococcus aureus ATCC 29212, S. aureus ATCC 25923 y aislamientos clínicos de S. aureus sensible a meticilina.

Variabilidad química del “tomillo silvestre” (acantholippia seriphioides, verbenaceae) en la meseta Patagónica / Chemical Variability of “tomillo silvestre” (acantholippia seriphioides, verbenaceae) in the Patagonian plateau

El tomillo silvestre es una planta aromática y medicinal de amplio uso en varias regiones de Argentina como medicinal y saborizante. Se estudiaron poblaciones de Acantholippia seriphioides en dos zonas de la meseta chubutense, los parajes El Pajarito y La Rueda. Las partes aéreas oreadas fueron extraídas por hidrodestilación y los aceites esenciales se analizaron por GC-FID-MS. Los rendimientos en promedio de aceites esenciales fueron de 5.2 ml/kg y 3.2 ml/kg, para La Rueda y El Pajarito respectivamente. Los tipos químicos encontrados fueron: ipsilon-terpineno/timol/carvacrol en La Rueda y mirtenol/geraniol/carvona en El Pajarito. El probable quimiotipo de este último sitio difiere marcadamente de los reportados en trabajos previos para esta especie y presenta además importante variabilidad cuantitativa, según el estado fenológico.

“Tomillo silvestre” is a widespread medicinal and aromatic plant with medicinal and flavoring uses in numerous regions of Argentina. Acantholippia seriphioides populations from two areas of the Chubut’s plateau: El Pajarito and La Rueda, have been studied. The dried aerial parts were extracted by hydrodistillation and the essential oils were analyzed by GC/FID/MS. The average yields of oils were 5.2 ml/kg and 3.2 ml/kg for La Rueda and El Pajarito, respectively. The chemical profiles found were: ypsilon-terpinene/thymol/carvacrol in La Rueda and myrtenol/geraniol/carvone in El Pajarito. The feasible chemotype from the latter area is significantly different from those previously reported for this species, and it also showed an important quantitative variation according to the phenological stages.

Growth inhibition and morphological alterations of Staphylococcus aureus caused by the essential oil of Aloysia triphylla / Inhibición del crecimiento y alteraciones morfológicas de Staphylococcus aureus causadas por el aceite esencial de Aloysia triphylla

Aloysia triphylla essential oil (EO) has antimicrobial activity on Staphylococcus aureus which is a pathogen responsible for severe infections and food contamination. The target of EO is mainly in the cytoplasmic membrane. In this work the mechanisms of action of the EO of A. triphylla on S. aureus were investigated. A. triphylla was collected from La Paz. The oil was analyzed by GC-MS. The antimicrobial effects were evaluated by MIC, MBC, killing time and TEM. MIC values were 23 μg/mL for 6.3 x 104 CFU/mL, 92 μg/mL for 5.71 x 105 CFU/mL and 180 μg/mL for 9 x 106 CFU/mL. The MBC was 5920 μg/mL for all cellular concentrations and it was necessary more time to kill bigger cell populations. Multilamellar and mesosome-like structures on the membrane were seen by TEM. A. triphylla oil is an antibacterial compound against S. aureus which main mechanism of action seems to be the cytoplasmic membrane disruption.

El aceite esencial (AE) de Aloysia triphylla posee actividad antimicrobiana contra Staphylococcus aureus, patógeno responsable de infecciones nosocomiales e alimenticias. El blanco de acción de los AE es la membrana citoplasmática. El mecanismo de acción del AE de A. triphylla sobre S. aureus fue investigado. El AE de A. triphylla (La Paz, Argentina) fue analizado por CG-EM. Se evaluó́ el efecto antimicrobiano por CIM, CBM, tiempo de muerte y MET. Los valores de CIM fueron 23 μg/mL para 6.3 x 104 UFC/mL, 92 μg/mL para 5.71 x 105 UFC/mL y 180 μg/mL para 9 x 106 UFC/mL. La CBM fue 5920 μg mL para todas las concentraciones celulares estudiadas. El tiempo de muerte fue determinado; necesitando mayor tiempo para matar una población celular elevada. Fueron observados por MET estructuras multilamerales y semejantes a mesosomas. El AE de A. triphylla es un potencial compuesto antibacteriano contra S. aureus donde su principal mecanismo de acción es por disrupción de la membrana citoplasmática.

Acantholippia deserticola essential oil as a natural pesticide againstagricultural plagues woolly whitefly [Aleurothrixus floccosus (Maskell)],Chilean false red mite (Brevipalpus chilensis Baker) and two-spotted mite(Tetranychus urticae Koch) / Aceite esencial de Acantholippia deserticola como pesticida natural contra plagas agrícolas como mosquita blanca algodonosa [Aleurothrixus floccosus (Maskell)], falsa arañita de la vid (Brevipalpus chilensis Baker) y arañita bimaculada (Tetranychus urticae Koch)

Different concentrations of essential oil obtained from Acantholippia deserticola (Phil.ex F. Phil.) Moldenke were assessed against Chilean agricultural pests like Aleurothrixus floccosus (Maskell), Brevipalpus chilensis Baker, and Tetranychus urticae Koch. Thebioassays were carried out under laboratory conditions and both direct and residual applications were done through Potter precision spraytower test. The oil was obtained by steam distillation containing a rich fraction of alpha and beta-thujones (88.4 percent) and it shows marked toxic effects against pests. Indeed, a mortality of 82 percent and 89 percent was observed in both B. chilensis and T. urticae after 48 h whereas in A. floccosus over 97 percent of mortality was seen after 7 days. These results open the possibility to use essential oil from Acantholippia deserticola as natural pesticide.

Se evaluó el efecto a diferentes concentraciones de una solución de aceite esencial de Acantholippia deserticola sobre plagas agrícolas en Chile, tales como Aleurothrixus floccosus (Maskell), Brevipalpus chilensis Baker y Tetranychus urticae Koch. Los bioensayos fueron realizados mediante una torre de Potter en condiciones de laboratorio y las aplicaciones fueron directas y residuales. El aceite se obtuvo por hidrodestilación, el cual contenía una gran cantidad de alfa and beta-tuyonas (88.4 por ciento), mostrando marcados efectos tóxicos para A. floccosus, con un 97 por ciento de mortalidad después de 7 d y, para B. chilensis, y T. urticae, con una mortalidad de 82 por ciento y 89 por ciento respectivamente, después de 48 h. Estos resultados abren la posibilidad de usar aceite esencial de Acantholippia deserticola como pesticida natural.

Antidepressant and anxiolytic-like effects of essential oil from Acantholippia deserticola Phil in female rats / Efecto ansiolítico y antidepresivo del aceite esencial de Acantholippia deserticola Phil en ratas hembras

Acantholippia deserticola (Phil.ex F. Phil.) Moldenke is a Verbenaceae that has long been used in traditional medicine in Tarapacá (Chile) as an analgesic, anti-inflammatory and aphrodisiac agent. Sincé alpha - and beta -thujone were identified as the main constituents (88.4 percent) of the essential oil from this plant, we investigated its biological properties. The results show that the essential oil from Acantholippia deserticola decreased locomotive and rearing activity compared to control group rats, including those treated with diazepam, but the essential oil had no effects on head movements or grooming. The essential oil also had significant anxiolytic and antidepressant effects. This essential oil, therefore, has sedative, anxiolytic and antidepressant actions on the rat central nervous system.

Acantholippia deserticola es una Verbenaceae de uso en la medicina tradicional como analgésico, antiinflamatorio y afrodisíaco en la región de Tarapacá, Chile. En el aceite esencial se ha identificado alfa - and beta -tuyonas como principales constituyentes (88.4 por ciento) de esta planta, que ha llevado a investigar sus propiedades biológicas. Los resultados muestran que el aceite esencial de Acantholippia deserticola disminuye la locomoción y el levantamiento en dos patas, en comparación con el grupo control, incluido el tratado por el diazepam, pero el aceite esencial no tuvo efecto sobre la sacudida de cabeza y el acicalamiento. En ambas pruebas, se observa un efecto significativo del aceite esencial en los efectos ansiolíticos y antidepresivos, lo que indica que el aceite esencial tiene actividad sedante, ansiolítica y antidepresiva en el sistema nervioso central.

Stachytarpheta gesnerioides Cham: chemical composition of hexane fraction and essential oil, antioxidant and antimicrobial activities / Stachytarpheta gesnerioides Cham: composición química de la fracción hexánica y aceite esencial, actividades antioxidante y antimicrobiana

In the present study we investigated the chemical composition of hexane fraction and essential oil of Stachytarpheta gesnerioides (Verbenaceae) by GC-MS, total phenol and flavonoid contents. The antioxidant capacity and antimicrobial activity were investigated in five extracts of leaves of S. gesnerioides. Aqueous and 100 percent ethanol extracts were prepared by dynamic maceration. Hexane, ethyl acetate and methanol extracts were prepared by Soxhlet extraction. The essential oil (EO) and hexane fraction (HF) are mainly composed by guaiol. Moreover, the HF is also rich in the monoterpene alpha-pinene. The total phenol content ranged from 0.85 to 22.74 mg gallic acid equivalent /100mg dry extract at Folin–Ciocalteu’s reagent method. The total flavonoid concentration ranged from 0.68 to 13.65 mg rutin equivalent /100mg dry extract, detected using 8 percent aluminium chloride. The ethyl acetate extract (IC50=9.41 ug/ml) showed the highest antioxidant activity. The extracts were found to be effective to inhibit the microorganisms tested.

Se han investigado la composición química de la fracción hexánica (FH) y aceite esencial (AE) de Stachytarpheta gesnerioides (Verbenaceae) por GC-MS, el contenido de fenoles totales y flavonoides. La capacidad antioxidante y actividad antimicrobiana fueron investigadas en cinco extractos de hojas de S gesnerioides. Extractos acuosos y etanolico fueron preparados por la maceración dinámica y extracción continua en Soxhlet con hexano, acetato de etilo y metanol. Las fracciones AE y FH están compuestas principalmente por guaiol. La fracción FH es también rica en alfa-pineno. El contenido de fenoles totales varió desde 0,85 hasta 22,74 mg de ácido gálico/100 mg de extracto seco (Folin-Ciocalteu). La concentración total de flavonoides varió desde 0,68 hasta 13,65 mg en equivalentes de rutina/100 mg de extracto seco, que se detectó mediante reacción con cloruro de aluminio al 8 por ciento. El extracto de acetato de etilo (CI50=9,41 ug/ml) enseño la más grande actividad antioxidante. Los extractos se encontraron eficaces para inhibir los microorganismos ensayados.

Dinámica de polifenoles de “Cedrón” (Aloysia citrodora Palau -Verbenaceae-) en relación al desarrollo foliar / Polyphenol dinamics on “cedrón” (Aloysia citrodora Palau -Verbenaceae-) according to leave development

Leaf infusions from Aloysia citrodora Palau –Verbenaceae-, known as “cedrón” were analyzed in order to establish the possible influence of their development on polyphenols profile. Chromatographic fingerprints of infusions from young and full expanded leaves were performed and total phenols, total tannins, total flavonoids and total hydroxycinnamic acids were quantified. Young leaves had significative higher total phenols, total flavonoids and total hydroxycinnamic acids concentrations than full expanded leaves. This research suggest that the analyzed parameter should be considered when elaborating products from “cedrón” leaves, as the variation in compound concentration may translate in different biological activities.

Se analizaron las infusiones realizadas a partir de las hojas de Aloysia citrodora Palau –Verbenaceae-, conocida vulgarmente como “cedrón”, con el objeto de establecer la influencia del grado de desarrollo foliar en el perfil de polifenoles. Se obtuvieron los perfiles cromatográficos y se cuantificaron los fenoles totales, taninos totales, flavonoides totales y ácidos hidroxicinámicos totales provenientes de los extractos acuosos de las hojas jóvenes y adultas. Se observaron diferencias cuali-cuantitativas en el perfil de polifenoles cuando se comparan las hojas jóvenes con las hojas adultas. En las hojas jóvenes, las concentraciones de fenoles totales, flavonoides totales y ácidos hidroxicinámicos totales resultaron ser significativamente superiores a las determinadas en las hojas adultas. Los estudios realizados sugieren que la variable aquí analizada debe ser considerada al momento de elaborar productos en base a hojas de cedrón, dado que las diferentes concentraciones detectadas podrían traducirse en diferentes actividades biológicas.

Análisis de polifenoles, actividad antioxidante y genotoxicidad en especies argentinas de Lippia y Aloysia (Verbenaceae) / Survey on polyphenols, antioxidant activity and genotoxicity on Argentinean species of Lippia and Aloysia (Verbenaceae)

Three species and a variety from the Verbenaceae belonging to the argentinean flora were analyzed: Aloysia gratissima var. gratissima (Gill. Et Hook) Tronc., Aloysia gratissima var. schulziana (Moldenke) Botta, Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke and Lippia integrifolia (Griseb.) Hieron., the first two known as “cedrón del monte”, the third as “yerba del burro” and the other as “incayuyo”. Their leaves are used as digestive in folk medicine. The research was performed on quantification of polyphenols (total phenols, total flavonoids and total hydroxicinnamic acids) and on determination of antioxidant and genotoxic activities. L. integrifolia showed the highest total phenol concentration and A. polystachya the lowest, but with the highest concentration of hydroxicinnamic acids. When flavonoids were quantified, A. polystachya showed the lowest concentations and A. gratissima var. schultziana the highest. According to quantification of total polyphenols, the lowest antioxidant activity was measured in A. polystachya extracts, followed by those from A. gratissima var. gratissima and A. gratissima var. schulziana, while extracts from L. integrifolia showed the highest antioxidant activity. No genotoxic activity was detected by means of the comet-assay for any of the species. This absence of genotoxicity, added to the relevant antioxidant activity, could justify the use of leaves infusions and decoctions from these species in treatments of those pathologies where antioxidants play an important role. These studies suggest their sure use in folk medicine, in which people include them among their medicinal plants.

Se analizaron 3 especies y una variedad de la familia Verbenaceae de la flora argentina: Aloysia gratissima var. gratissima (Gill. Et Hook) Tronc., Aloysia gratissima var. schulziana (Moldenke) Botta, Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke y Lippia integrifolia (Griseb.) Hieron., conocidas como “cedrón del monte” las dos primeras, “yerba del burro” la tercera e “incayuyo” la restante. De todas ellas se emplean las hojas en la medicina popular como digestivas. Se investigaron los contenidos de polifenoles (fenoles totales, flavonoides totales y ácidos hidroxicinámicos totales) y se determinó la capacidad antioxidante y genotoxicidad de las preparaciones acuosas (infusiones y cocimientos). L. integrifolia fue la especie con mayor contenido de fenoles totales y A. polystachya la menor. En el análisis de los hidroxicinámicos, A. polystachya fue la que mayor concentración mostró. En cuanto a los flavonoides, A. polystachya fue la que poseyó menor concentración en tanto que A. gratissima var. schultziana fue la más rica en estos compuestos. A. polystachya es la especie que presenta los menores valores de actividad antioxidante, seguida por A. gratissima var. gratissima y A. gratissima var. schulziana, mientras que L. integrifolia es la especie con mayor actividad antioxidante, en correlación con los valores de polifenoles totales. Ninguna de las especies analizadas demostró actividad genotóxica en el ensayo del cometa. La ausencia de genotoxicidad, sumada a una marcada actividad antioxidante, justificarían el empleo de las infusiones y cocimientos en el tratamiento de aquellas patologías donde los agentes antioxidantes juegan un importante rol terapéutico. Estos estudios sugieren el empleo seguro en la medicina tradicional de los pueblos y comunidades que las incluyen entre sus plantas medicinales.

Toxicity of the essential oil of the cytral chemotype of Lippia alba (Mill.) N. E. Brown

The essential oil (EO) of Lippiaalba (Mill.) N. E. Brown (Verbenaceae) has been traditionally used to treat several diseases. In this study, the acute toxic effects of the citral chemotype of L. alba EO were evaluated in mice. Animals were treated via intraperitoneal receiving the L. alba essential oil at doses between 50 and 2500 mg/kg, and the control group received sesame oil (vehicle). The EO induced dose-dependent neurotoxic effects at doses greater than 1000 mg/kg, including decreased locomotion, motor skills and muscle strength, hypotonia, dyspnea, kyphosis and convulsions. The EO was lethal at a dose of 2500 mg/kg. Animals receiving 1000 mg/kg were euthanized at the end of the treatment period and their blood and livers were collected for analysis. Mice exposed to L. alba EOpresented significantly greater plasma alanine aminotransferase (ALT) activities than the control group. Liver histological changes included mild inflammation, in particular, an increase in nuclear size. Compared to vehicle control group, changes in expressionfor selected genes were significant for FABP5, a fatty acid transport related gene. In summary, the intraperitoneal administration of L. alba EO (citral chemotype) causes neurological damage in mice at doses equal or greater than 1500 mg/kg, whereas at 1000 mg/kg, it generates mild liver damage. Therefore, the systemic use of this EO raises concerns about its safety.

El aceite esencial (AE) de Lippia alba(Mill.) NE Brown (Verbenaceae) ha sido utilizado tradicionalmente para tratar varias enfermedades. En este estudio, los efectos tóxicos agudos del AE de Lippia alba quimiotipo citral fueron evaluados en ratones. Los animales fueron tratados por vía intraperitonealrecibiendo el AE en dosis entre 50 y 2500 mg/kg de peso, y el grupo control aceite de sésamo (vehículo). Dosis superiores a 1000 mg/kg del AE mostraron efectos neurotóxicos incluyendo disminución de la locomoción e hipotonía, disnea, cifosis y convulsiones. El AE fue letal a la dosis de 2500 mg/kg. Veinticuatro horas después de que los animales fueron tratados con 1000 mg/kg del AE se les realizó eutanasia y su sangre e hígado fueron recolectados para análisis. Los ratones expuestos al AE de L. alba, presentaron actividad alanina aminotransferasa (ALT) en plasma significativamente mayor que el grupo control. Dentro de los cambios histológicos hepáticos se incluyen inflamación leve, en particular, un aumento del tamaño nuclear. En comparación con el grupo control, la expresión de genes seleccionados tuvo diferencias significativas para FABP5, un gen relacionado con el transporte de ácidos grasos. En conclusión, la administración intraperitoneal del AE de L. alba (quimiotipo citral) causa dañosneurológicos en ratones a una dosis igual o superior a 1500 mg/kg, mientras que a 1000 mg/kg, genera daño hepático leve. Por lo tanto, el uso sistémico de este AE plantea preocupaciones en cuanto a su seguridad.

Antioxidant activity of 50 percent aqueous: ethanol extract from Acantholippia deserticola

The antioxidant properties oí Acantholippia deserticola, a herb used in traditional northern Chilean medicine was studied using free radical - generating systems. The 50 percent aqueous - ethanol extract oí Acantholippia deserticola protected against non-enzymatic lipid peroxidation in microsomal membranes of rat, induced by an Fe++ - ascorbate system and measured spectrophotometrically by the TBARS test, and had strong free radical scavenging capacities on stable ABTS and DPPH radicáis. The results shows that the IC50 valué of the 50 percent aqueous - ethanolic extract oí A.deserticola is 18 ± 0.5 μg/mL in DPPH radical - scavenging, 15 ± 0.8 μg/mL in lipid peroxidation , Total Antioxidant Activity (TAA) is 0.95 mM of Trolox per mg/mL of extract. The total phenolics content of extract is 725 ± 12 mg of gallic acid equivalent per g of dried extract. The results indicate that the 50 percent aqueous - ethanol extract oí Acantholippia deserticola clearly has antioxidant properties.